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紅藻龍鬚菜蛋白水解物機能探討

為了解決定量粉末分裝器的問題，作者黃秀鳳 這樣論述：

本研究目的為探討紅藻龍鬚菜Gracilaria tenuistipitata，經鳳梨酵素(bromelain)作用所獲得之水解產物，將水解蛋白以硫酸銨濃度鹽析出，進行特性分析與抗自由基活性評估，期篩選出具活性之海藻蛋白。海龍鬚菜加入定量之鳳梨酵素(酵素/受質比1:100)及pH 6.2緩衝溶液，在37℃下進行水解15小時後，水解液分成兩部份進行實驗，第一部份直接進行凍乾處理後，進行電泳分析。第二部份將水解物之蛋白質以不同硫酸銨濃度範圍(0-20%、20-40%、40-60%及60-80%)鹽析出，經透析(dialysis)後將此四鹽析物進行冷凍乾燥處理，所得凍乾物除進行蛋白質電泳了解水

解蛋白分子大小外，並進行in vitro抗自由基活性分析。本研究結果顯示探討藻水解蛋白之抗自由基活性，包括DPPH自由基清除能力、氫氧自由基清除能力、超氧陰離子自由基清除能力及DNA氫氧自由基氧化傷害保護試驗。實驗結果顯示20-40與40-60％硫酸銨鹽析藻水解蛋白具較顯著抗自由基機能性。關鍵字：紅藻龍鬚菜、鳳梨酵素、蛋白質水解物、鹽析、透析、抗自由基活性

高雄地區立復平抗藥性結核桿菌最低抑制濃度與rpoB基因突變之關係及DNA分子指印分析

為了解決定量粉末分裝器的問題，作者黃杏玉 這樣論述：

本研究從高雄地區的結核病人分離出63株立復平（rifampin，RFP）抗藥性結核桿菌菌株（≧ 1 μg/ml RFP）。以核酸定序檢查這些抗藥菌株rpo B基因內的157 bp（codon 499-codon 551）片段時，發現約有84.1﹪（53/63）的立復平抗藥性菌株發生點突變，又以codon 531、codon 526及codon 516三個位置所佔的突變比率最高，分別為41.5﹪、18.9﹪及15.1﹪。在這些立復平抗藥性菌株計有15種不同的突變型式，其中5種為新的突變型式。另有15.9﹪（10/63）的立復平抗藥性菌株在此157 bp片段中並無突變存在，

在rpo B基因的另一段365 bp（codon 99-codon 220）亦無變異發生；對照組的無抗藥性結核菌株在157 bp與365 bp兩片段內，亦無突變發生。 以明膠比例法（agar proportion method）來測量這些抗藥性結核桿菌RFP最低抑制濃度（MIC）時，發現53株rpo B基因157 bp有突變之菌株，平均MIC值為92.38 μg/ml，顯著地比其餘10株在此rpo B基因157 bp內無突變菌株之平均MIC值（24.8 μg/ml）要來得高；亦即rpo B基因157 bp內的突變、胺基酸的替代確實會影響到MIC值的高低。

IS6110插入序列（insertion sequence）已知遍存於所有結核桿菌DNA中，此多重序列經由內核酸限制酵素切割後，會產生高度限制片段長度之多型性（restriction fragment length polymorphism；RFLP），在所收集的59株抗藥性結核桿菌及19株敏感性結核桿菌中，其DNA內IS6110之數量介於1至20個copies。以RFLP 90﹪標準相似性（similarity）則可分成76種不同的分子指印模式。 本實驗結果顯示，以RFLP分型時大多數菌株之分子指印模式相互間仍有相當程度的差異，由於同一分子指印模式的菌株為數甚

少，顯示近年來高雄地區立復平抗藥性菌株並無爆發性的結核病流行發生。此外，本實驗也建立了高雄地區立復平抗藥性結核菌株指印模式之資料庫，提供了結核病之流行病學與公衛防治上的參考。